|
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP4043 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
無乳支原體PCR檢測試劑盒供應 | Mycoplasma agalactiaePCR | BKP4043 |
技術(shù)服務內(nèi)容：
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢：
1. 特異性：無乳支原體PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
心肌成纖維細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)Calciumoxalate乙二酸鈣25毫克CP，98%
Mo7e細胞，人巨細胞細胞株 小鼠正常肝細胞,NCTC1469細胞 角臘上皮細胞生長添加物CEpiCGS頭孢炳1(E)-異構(gòu)體 Cqfprozil (q)-IsoMqr 9676-86-3
NCI-H226(人肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2Urokinase雅激酶5克BR，2-5u/ul，99%
BT-474(人導管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M085小鼠細胞完全培養(yǎng)基100mL 人Burkkit瘤細胞;DaudiSMBUFFERSM 緩沖液超級500MLRT
非洲綠猴腎細胞系/IgRCD4+;VERO/IgRCD4+D 1mg/5mg/10mg Fluka 01815
Dami(人巨核細胞細胞) 5×106cells/瓶×2 人絨毛間充質(zhì)成纖維細胞HVMF鹽酸尼莫司汀Nimustine HCl(ACNU)質(zhì)量規(guī)格：>97.0%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
原代上皮細胞特制基礎無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/100mlBEZ235 (Dactolisib)NVP-BEZ 235質(zhì)量規(guī)格：>98%;ATP競爭性PI3K和mTOR抑制劑
IL1R2 Others Rat 大鼠 IL1R2 / IL1RB / CD121b 人細胞裂解液 (陽性對照) 吡嘧司特鉀Pemirolast potassium質(zhì)量規(guī)格：>98%
大鼠成年表皮角質(zhì)形成層細胞完全培養(yǎng)基 100mL培哚普利Perindopril erbumine質(zhì)量規(guī)格：>98%,鹽形式
VERO C1008 (E6)非洲綠猴腎細胞 VERO C1008 (E6) of African green monkey kidney cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS保泰phenylbutazone質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP
無乳支原體PCR檢測試劑盒供應CD200 Others Mouse 小鼠 CD200 人細胞裂解液 (陽性對照) (S)-鹽酸奧昔布寧(S)-Oxybutynin hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：美國進口
人肝內(nèi)膽管上皮細胞裂解物HIBEpiCL奧司他韋酸Oseltamivir Acid質(zhì)量規(guī)格：美國進口
NRG1 Others Human 人 NRG1-beta 1 (ECD) 人細胞裂解液 (陽性對照) 地布卡因Dibucaine質(zhì)量規(guī)格：美國進口
人腦膜細胞完全培養(yǎng)基 100mL鹽酸地布卡因-d9Dibucaine-d9 Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：美國進口
MC53細胞，小鼠腎系膜細胞 RD(惡性胚胎橫紋肌瘤) 貓腎細胞;F81多利培南Doripenem質(zhì)量規(guī)格：美國進口
Promocell C-28056 M2-Macrophage GenerationMedium DXF, M2-巨噬細胞生成培養(yǎng)基DXF 250ml雙嘧達莫二-O-β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格：美國進口Dipyridamole Di-O-β-D-glucuronide
人主動脈平滑肌細胞cDNAHASMC cDNA雙嘧達莫-D20 (主要的)質(zhì)量規(guī)格：美國進口Dipyridamole-D20 (Major)
IFNA4 Others Rat 大鼠 IFNA4 / IFNα4 / Ierferon alpha-4 人細胞裂解液 (陽性對照) 雙嘧達莫單-O-β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格：美國進口Dipyridamole Mono-O-β-D-glucuronide
人皮下脂肪細胞完全培養(yǎng)基 100mL酮基他米巴羅汀質(zhì)量規(guī)格：美國進口Keto Tamibarotene
C2C12細胞，鼠肌原細胞 H08910(細胞) 大鼠胰島細胞瘤細胞;INS-1ent-伏立康唑質(zhì)量規(guī)格：美國進口ent-Voriconazole
反應五要素：
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
