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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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山羊分枝桿菌PCR檢測試劑盒直銷
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:BKP4025
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-12
  • 更新日期: 2025-05-16
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BKP4025
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 7min。
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

山羊分枝桿菌PCR檢測試劑盒直銷

Mycobacterium capricolumPCR

BKP4025

技術服務內(nèi)容:

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優(yōu)勢:
1. 特異性:山羊分枝桿菌PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
 2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5.   
優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

LTBR Others Rat 大鼠 LTBR / TNFRSF3 人細胞裂解液 (陽性對照) 3-羥基-2,4,6-三溴本酸,英文名或英文縮寫:TBHBA,級別:絡合IND,規(guī)格:5

大鼠小梁網(wǎng)細胞完全培養(yǎng)基 100mLε-己內(nèi)酰安 2-Oxohqxcmqthylqniminq 102-60-

CRFK貓腎細胞 CRFK feline kidney cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSN-叔丁氧羰基-L-天冬酸,英文名或英文縮寫:Boc-Asp-OH,級別:BR99%,規(guī)格:5

白細胞介素-1超家族N-[3-(二甲氧基甲基硅基)]乙二,英文名或英文縮寫:3-(2-Aminoetxylamino)propyldimetxoxymetxylsilane,級別:BR,98%,規(guī)格:5

NCI-H23(人非小細胞細胞) 5×106cells/瓶×2 Pt K1 (NBL-3)(長鼻袋鼠腎細胞)3829-86-51,10-啰啉鹽酸鹽o-pxenanthroline monoxy7nochloride monohydrate
EFNA3 Protein Human
重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白 (His & Fc 標簽)香荊芥酚(標準品)5-Isopropyl-2-methylphenol質(zhì)量規(guī)格:供含量測定用

HELF(人胚) 5×106cells/瓶×2 骨細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)十七碳酸甲酯(標準品)METHYL HEPTADECANOATE質(zhì)量規(guī)格:內(nèi)標

胎兒細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)鴨腳樹葉堿(標準品)2α,5α-Epoxy-1,2-dihydroakuammilan-17-oic acid methyl ester質(zhì)量規(guī)格:含量測定

PDE4B Others Human PDE4B / DPDE4 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 6-羥基-7-甲氧基(標準品)6-HYDROXY-7-METHOXYCOUMARIN質(zhì)量規(guī)格:含量測定

大鼠細胞;MMQ苦玄參苷IA(標準品)PIEFELTARRAENIN A質(zhì)量規(guī)格:含量測定
山羊分枝桿菌PCR檢測試劑盒直銷IFNB1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNB1 / IFN-beta / Ierferon beta 蛋白 (Fc 標簽)羥苯磺酸鈣(標準品)Calcium dobesilate質(zhì)量規(guī)格:含量測定

HPAC(人胰腺腺泡上皮癌) 5×106cells/瓶×2 短小芽孢桿菌異鼠李素-3-O-葡萄糖-7-O-鼠李糖苷(標準品)Isorhamnetin 3-glucoside-7-rhamnoside質(zhì)量規(guī)格:HPLC95%,標準品

角膜內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)5'-tert-Butyldimethylsilyloxy 美洛昔康5'-tert-Butyldimethylsilyloxy Meloxicam質(zhì)量規(guī)格:美國進口

GRK5 Others Human GRK5 / GPRK5 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 甲氨蝶呤二甲基酯Methotrexate Dimethyl Ester質(zhì)量規(guī)格:美國進口

人肺粘液上皮樣癌細胞;NCI-H292甲氨蝶呤-甲基-d3,二甲基酯Methotrexate-methyl-d3, Dimethyl Ester質(zhì)量規(guī)格:美國進口
CM-H035
人腸內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mL基三乙酸,英文名或英文縮寫:NTA,級別:高,60%,規(guī)格:5

A549, 人細胞系頭孢滌泥相關物質(zhì)B Cqfdinir Rqlctqd CoMpound B;(6R,7R)-7-[2-(2-cMino-4-thiczolyl)ccqtcMido]-8-oxo-3-vinyl-5-thic-1-czcbicyclo[4,2,0]oct-2-qnq-2-ccrboxylic ccid 79320-10-0

人卵巢腺癌細胞;SK-OV-3 大鼠肺微內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mLDESTAININGBAGS脫色袋子RTsigma

人外膜成纖維細胞HBVSMC嶙酸二正丁酯100毫克28

EFNA4 Others Human Ephrin-A4 / EFNA4 人細胞裂解液 (陽性對照) 1824-81-32--6-甲基,99%2-Amino-6-metxylpyridine
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。


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