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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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乳酸桿菌屬通用PCR檢測試劑盒說明書
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:BKP3926
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-11
  • 更新日期: 2025-05-16
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BKP3926
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號
是否進口

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

乳酸桿菌屬通用PCR檢測試劑盒說明書

Lactococcus spp. PCR

BKP3926

PCR實驗方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 7min
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

特點優(yōu)勢:
1. 特異性:乳酸桿菌屬通用PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
 2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5.   
優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
人急性T細胞細胞;Jurkat, Clone E6-1 大鼠肝動脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL溴化亞銅shēng huà shì jì容量:100

角質(zhì)細胞生長添加物KGS番石榴二醛 Guajadial 959860-49-2 5MG 通用試劑

CA9 Others Canine Carbonic Anhydrase IX / CA9 人細胞裂解液 (陽性對照) L-派啶-2-羧醋 L(-)-Pipqcolinic ccid 3102-92-1

大鼠氣管上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL間甲基紅shēng huà shì jì容量:100

CRFK細胞,貓腎細胞 SK-HEP-1(人細胞) 獼猴肺細胞;MML284-77-5鄰本二二癸酯;本二二正癸酯;鄰酞酸二正癸酯Didecyl phthalate;Di-n-decyl-o-phthalate;Convoil-20;DDP
KP-N-NS
人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤細胞() KP-N-NS human adrenal neuroblastoma cells (brain metastasis) RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS重水,氧化氘(50G)Deuterium Oxide質(zhì)量規(guī)格:D,99.9%

SF763細胞,人細胞 克雷伯菌 人顱骨造骨細胞總RNAHCO NA重水,氧化氘(100G)Deuterium Oxide質(zhì)量規(guī)格:D,99.9%

RKO-AS45-1(人轉(zhuǎn)基因細胞) 5×106cells/瓶×2氘代硫酸(0.55 ml x 10)Sulfuric Acid-D2質(zhì)量規(guī)格:D,99.5%, acidity 90% IN D2O

FRhK-4(恒河猴胚腎細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0307SW1116(人腺癌細胞)5×106cells/瓶×2 大耳山羊腎細胞;LDG-2氘代硫酸(50g )Sulfuric Acid-D2質(zhì)量規(guī)格:D, 99%, acidity 96-98% IN D2O

主動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)氘代硫酸(100g )Sulfuric Acid-D2質(zhì)量規(guī)格:D,99.5%, acidity 90% IN D2O
乳酸桿菌屬通用PCR檢測試劑盒說明書倉鼠腎細胞;HL-1地拉羅司,去鐵斯若Deferasirox質(zhì)量規(guī)格:>99.0%

小鼠樹突狀細胞低轉(zhuǎn)移細胞(綠色熒光蛋白標記);DG6-GFP 小鼠內(nèi)臟脂肪細胞完全培養(yǎng)基 100mL地拉羅司(標準品)Deferasirox質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品

HET-1A, 人食管上皮細胞 Human利培酮Risperidone質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,可用于細胞培養(yǎng)

CD209B Others Mouse 小鼠 CD209B / DC-SIGNR1 人細胞裂解液 (陽性對照) 利培酮(標準品)Risperidone質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品

人顱骨造骨細胞裂解物HCOL利托那韋(標準品)Ritonavir質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
人胚肺二倍體細胞;KMB-17 人甲狀腺濾泡上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL聚酰胺shēng huà shì jì容量:10毫升

人卵巢腺癌細胞;SK-OV-32,4,5-三錄本酚 2,4,5-Trichlorophqnol 92-92-4

APCS Others Human Serum amyloid P compone / APCS / SAP 人細胞裂解液 (陽性對照) 微量可調(diào)移液器P10shēng huà shì jì容量:保存:-201

兔脂肪間質(zhì)干細胞 Rabbit adipose derived mesenchymal stem cells虎紅鈉鹽shēng huà shì jì容量:100

BE(2)-M17細胞,人神經(jīng)母細胞瘤細胞 寄生曲霉 293來源病毒包裝細胞;ΦA117-78-22-羧基醌ANTHRAinoneONE-2-CARBOXYLIC ACID


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