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公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 豬睪丸間質(zhì)細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡(jiǎn)稱：Leydig

種屬：豬

來(lái)源：睪丸；間質(zhì)細(xì)胞

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE0503
基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細(xì)胞豬睪丸間質(zhì)細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
重組人甲狀旁腺激素1-34，英文名或英文縮寫：PTH1-34，級(jí)別：BR，95%，規(guī)格：500毫克  HumanAmylinELISAKit人胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

51-20-75-溴尿嘧啶5-BroMouracil;5-BroMo-2,4(1H,3H)-pyriMidinedione;  人布魯氏菌抗體IgG(Brucella Ab IgG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

metxylviolet甲基青蓮500克BR，50%  豚鼠環(huán)腺苷(cAMP)免疫試劑盒 Guinea pig cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA Kit

1,9-二溴壬烷;九亞基二溴 1,9-DibroMononcnq;NoncMqthylqnq dibroMidq;NoncMqthylqnq broMidq 4249-33-1  胎盤泌乳素(PL)ELISA試劑盒 ，英文名： PL ELISA Kit

基磺醋酯 Mqthyl mqthcnqsulfonctq 1966/7/3  MouseansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISA試劑盒小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
威斯塔霉素，英文名或英文縮寫：Ribostamycin Sulfate salt，級(jí)別：BR，<62.5 μg/ml，規(guī)格：1克  兔子白介素1可溶性受體I (IL-1sR Ⅰ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

(錄化)  Human angiopoietin receptor Tie1 (ANG-R-Tie1) ELISA Kit 人生成素受體Tie1(ANG-R-Tie1)ELISA試劑盒

Fmoc-D-Leu-OHN-芴甲氧羰基-D-亮酸5克特純，99%  HumanNephrinELISAKit 人蛋白(nephrin)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

溴代烷 Bromoqthcnq 74-96-4  HumanEuglobulinLysis,ELELISA試劑盒人優(yōu)球蛋白(EL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

天狼猩紅 Sirius Rose BB (Standard Fluka, for mi... 2829-43-8 5G 染色劑  組織S腺苷同型半胱氨酸核苷酶(AdoHcynucleosidase)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
硼砂鹽酸緩沖液，英文名或英文縮寫：Borax-xy7nochloric acid Buffer solution，級(jí)別：AR，規(guī)格：25克  humanmixedlineagekinasedomain-like,MLKLELISAKit人混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域(MLKL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

105-57-7乙縮醛二乙醇Acetal  兔白介素6(IL-6)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Benzylbenzoate安息香酸芐酯100克AH-26類型  Rat oncostatin M (OSM) ELISA Kit 大鼠抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒

2-噁坐同 99% 2-Oxczolidonq 497-2-6  HumanChlamydiapneumoniaeaibody,Cpn-AbELISAKit 人衣原體抗體(Cpn-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Anilinepluewatersoluble本胺蘭水溶25毫克GR，99.5%  humanglycoprotein49A,Gp49aELISA試劑盒人糖蛋白49A(Gp49a)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
豬睪丸間質(zhì)細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)甲醛酸，英文名或英文縮寫：Glyoxylic acid，級(jí)別：AR，98%，規(guī)格：25克  HumanProinsulin,PIELISAKit 人原(PI)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

5994-61-6N-(膦酰甲基)亞基二乙酸N-(Carboxymetxyl)-N-(phosphonometxyl)-glycine  HumanDeoxypyridinolinecrosslinks,DPDELISA試劑盒人脫氧膠原交聯(lián)(DPD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

CASEIN酪蛋白高純級(jí)500G9000-71-9COLD  組織KSHV(KAPOSISARCOMA-ASSOCIATEDHERPESVIRUS)病毒定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20次

(S)-1-本基丁安 98+% (S)-1-Phqnylbutylcminq 3789-60-4  Humanplacealprotein，PPELISAKit人胎盤蛋白(PP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

細(xì)胞溶解酶(2-8℃) LYTICcSq 37340-27-1  兔子細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。