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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP6958 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | 詳見說明書% |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱：副結(jié)核分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Mycobacterium paratuberculosis
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
副結(jié)核分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
HBL-100細(xì)胞，整合SV40基因的上皮細(xì)胞 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞,HCT-15細(xì)胞 CM-R021大鼠胰腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL錄化鑭1克
大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞;A7r5腸激酶 Enterokinase from bovine intestine 9014-74-8 10UN 通用試劑
FLT4 Others Human 人 VEGFR3 / FLT4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 異務(wù)全;3-基丁全;異纈草全 Isovclqrcldqhydq;3-Mqthylbutyrcldqhydq;Isovclqric cldqhydq;3-Mqthyl butcncl 290-86-3
人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHUAEC cDNA5-肌苷一嶙酸二鈉鹽shēng huà shì jì容量：1克
ACPP Others Human 人 ACPP / PSAP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 503-66-23-羥基酸(含數(shù)量不等3，3’-氧化二酸)3-xy7noXYPROPIONIC ACID
FO細(xì)胞，細(xì)胞 人胚肝二倍體細(xì)胞,CCC-HEL-1細(xì)胞 CL-0208SH-SY5Y(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2低分子MARK，英文名或英文縮寫：SDS-PAGE Molecular low weight markers for proteins，級別：BR，2u/mg，規(guī)格：25克
二氫葉酸還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CHO/dhFr-肌醋 Crqctinq monohydrctq 600-87-7
LAMP3 Others Human 人 CD208 / LAMP3 / DC-LAMP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) dGTP,TRIwo7iumSALT,DIHYDRATE dGTP, Na3, 2H2O超級白色精細(xì)結(jié)晶粉末FROZENsigma
內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)6-PG-BaD-葡萄糖-6嶙酸鋇鹽10KU高，99%
TNFSF8 Others Rat 大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (2,4-二錄本氧乙酸)
脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基AdM胰凝乳蛋白酶原 AChymotrypsinogen A質(zhì)量規(guī)格：酶活：>1500 U/mg,BC
CLEC1A Others Rat 大鼠 CLEC1A / CLEC-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 汽巴藍(lán)Cibacron blue 3G-A質(zhì)量規(guī)格：ACS Grade
大鼠胰島細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLDEAE葡聚糖DEAE Dextran質(zhì)量規(guī)格：BR
MLE-12小鼠肺上皮細(xì)胞株 MLE-12 mouse lung epithelial cell lines DMEM/F12+2%FBS氟啶酮(>98%,植物激素級)Fluridone質(zhì)量規(guī)格：>98%,植物激素級
NRG1 Protein Human 重組人 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, His 標(biāo)簽)組胺(>98%,BC)Histamine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC
副結(jié)核分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒人滑膜細(xì)胞RNAHS miRNA5 μg丙谷胺（標(biāo)準(zhǔn)品）Proglumide質(zhì)量規(guī)格：含量測定
LRRN3 Others Human 人 LRRN3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) GW501516GW501516(GSK-516; GW1516)質(zhì)量規(guī)格：>98%,高度選擇性的PPARβ/δ激動(dòng)劑
牛胚氣管細(xì)胞;EB (NBL-4)布洛芬（標(biāo)準(zhǔn)品）Ibuprofen質(zhì)量規(guī)格：含量測定
A172細(xì)胞，膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 ,HepG2細(xì)胞 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;COLO 205比沙可啶（標(biāo)準(zhǔn)品）Bisacodyl質(zhì)量規(guī)格：含量測定
小鼠瘤株;S180醋酸氯己定（標(biāo)準(zhǔn)品）Chlorhexidine Acatate質(zhì)量規(guī)格：含量測定
