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單純病毒2型PCR檢測試劑盒說明書【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復凍融，有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應避免反復凍融（最多凍融3次）；
u 運輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。

【產(chǎn)品名稱】: 單純病毒2型PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Herpes Simplex Virus(HSV)2PCR
【貨號】: BKP3798
組成及試劑配制:

酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

單純病毒2型PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板?？芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。

CD4 Others Human 人 CD4 / LEU3 人細胞裂解液 (陽性對照) ，英文名或英文縮寫：wo7ium metasilicate nonahydrate，級別：CP，70%，規(guī)格：5克

SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-7膽紅速(+4℃) Bilirubin 632-62-4

EPHA7 Others Human 人 EphA7 / EHK3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 1-溴代，英文名或英文縮寫：1-Bromooctane，級別：AR，47.8%，規(guī)格：100克

CL-0225SW620(人細胞)5×106cells/瓶×2BOC-Nim-芐基-L-組酸5克RT，避光

HAVSMC, 人主動脈平滑肌細胞 小鼠T細胞瘤(SV40T抗原轉染)，Cyc-tAg細胞 HMy2.CIR(人B 母細胞)Peptonepacto 100g/500g原裝 BD 211677
大鼠腎系膜細胞;RMC塞來昔布羧酸Celecoxib Carboxylic Acid質量規(guī)格：美國進口

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS2 細胞，HeLa 229細胞 EAC-E2G8細胞，鼠腹水瘤4'-反式-羥基西洛他唑4'-trans-Hydroxy Cilostazol質量規(guī)格：美國進口

人胚胎心肌組織來源細胞;CCC-HEH-23,4-脫氫西洛他唑3,4-Dehydro Cilostazol質量規(guī)格：美國進口

POSTN Others Mouse 小鼠 POSTN / OSF2 人細胞裂解液 (陽性對照) 西洛他唑-d11Cilostazol-d11質量規(guī)格：美國進口

胃粘膜上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)去二甲基氯化西酞普蘭鹽酸鹽Didemethylchloro Citalopram Hydrochloride質量規(guī)格：美國進口
腦動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)苝(升華提)(>99.0%(GC))Perylene (purified by sublimation)質量規(guī)格：>99.0%(GC)

CA46細胞，人Butts瘤細胞系 小鼠Lewis瘤株,LLT細胞 人肝臟星形細胞裂解物HHSteCL1,1,4,4-四苯基-1,3-丁二1(>99.0%(HPLC))1,1,4,4-Tetraphenyl-1,3-butadiene質量規(guī)格：>99.0%(HPLC)

NCI-H295R(人腎上腺皮質腺癌細胞) 5×106cells/瓶×28-羥基米氮平β-D-葡萄糖苷酸8-Hydroxy Mirtazapine β-D-Glucuronide質量規(guī)格：美國進口

CCRF-CEM(人急性細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0094HCC827(人非小細胞細胞)5×106cells/瓶×2 小鼠樹突狀細胞低轉移細胞(綠色熒光蛋白標記);DG6-GFP8-羥基米氮平8-Hydroxy Mirtazapine質量規(guī)格：美國進口

綠色熒光蛋白標記小鼠前細胞;MFC-GFPN,N-二乙酰 去-5'-氯-4-氟代芐基莫沙必利N,N-Diacetyl Des-5'-chloro-4-fluorobenzyl Mosapride質量規(guī)格：美國進口
單純病毒2型PCR檢測試劑盒說明書Hut-102(人皮膚T瘤細胞) 5×106cells/瓶×2(R)-(+)-4'-羥苯基卡維地洛質量規(guī)格：美國進口(R)-(+)-4'-Hydroxyphenyl Carvedilol

Promocell C-22020 Endothelial Cell GrowthMedium MV, 內皮細胞生長培養(yǎng)基MV(即用型) 500ml4'-芐氧基卡維地洛質量規(guī)格：美國進口4'-Benzyloxy Carvedilol

人食道上皮細胞裂解物HEEpiCL卡維地洛-甲基-d3質量規(guī)格：美國進口Carvedilol-methyl-d3

HEXA Others Human 人 Hexosaminidase A / HEXA Subunit A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 卡維地洛β-D-葡萄糖苷酸(mixture of diasteromers)質量規(guī)格：美國進口Carvedilol β-D-Glucuronide (mixture of diasteromers)

人結直腸腺癌細胞;HCT-15 [HCT15](S)-(-)-1-苯乙醇(>98.0%(GC))質量規(guī)格：>98.0%(GC)(S)-(-)-2-Methyl-1-butanol

PCR檢測試劑盒

 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。